品牌 | 其他品牌 | CAS | 9001-12-1 |
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貨號 | C0130 | 供貨周期 | 現貨 |
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應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),農業(yè),制藥 | | |
膠原酶 來源于溶組織梭菌
別名:梭菌肽酶 A
溶解性
TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 1-2 mg/mL at 37 °C
一般描述
膠原酶是一種可切割被稱為膠原蛋白的三螺旋蛋白的蛋白酶。存在有三種類型的組織膠原酶,而它們都屬于基質金屬蛋白酶(MMP)家族。從溶組織梭菌中獲得的膠原酶具有非常強的活性,因為它可在低至4-10℃的溫度下從兩端對膠原蛋白進行消化。粗膠原酶混合物含有兩種主要的酶類型,即膠原酶和梭菌蛋白酶。
應用
來自溶組織梭菌的膠原酶在生物學研究中具有廣泛的用途,它可用于制備分離的細胞懸浮液。該產品適用于人類腫瘤、小鼠腎臟、人類成人和胎兒腦、肺和許多其他上皮組織的解聚。它還被證明可有效用于肝臟和腎臟灌注研究、胰腺消化、非實質大鼠肝細胞的分離以及肝細胞的制備。 膠原酶已用于研究晚期糖基化終產物所需的動脈組織的制備。該酶已經測試可以約1 mg/mL的濃度釋放肝細胞。用于消化的濃度范圍是0.1至5 mg/mL。
生化/生理作用
該膠原酶產物是由溶組織梭菌所分泌的酶混合物組成,且不同的產物可通過在分泌酶中所發(fā)現的10-18種化合物的比例而進行區(qū)分。 主要的成分是兩種膠原酶、梭菌蛋白酶和一種中性蛋白酶。 這些酶的協同作用可降解膠原蛋白及其他細胞內物質。膠原酶和中性蛋白酶的作用對于從組織中有效釋放細胞是必需的。 不同類型的膠原蛋白是膠原酶的天然底物。
每摩爾膠原蛋白酶被4g原子鈣活化。 它被乙二醇-雙(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巰基乙醇、谷胱甘肽、巰基乙酸和8-羥基喹啉抑制。
注意
根據所提供的信息,該產品在-20°C下可穩(wěn)定保存一年。 在37℃、50℃和-20℃下FALGPA或蛋白酶的活性在30天內不會有損失。如果進行分裝(10mg / mL)并快速凍存在-20℃,則粗膠原酶的溶液是可以穩(wěn)定的。進一步的反復凍融會損壞溶液。 該產品在置于冰上時可保持100%活性超過7小時。
單位定義
一個膠原蛋白消化單元(CDU)從牛跟腱膠原蛋白中釋放的肽鏈量和1.0 μ亮氨酸,5小時,pH7.4,37℃,在鈣離子存在下的茚三酮顏色相同。一個 FALGPA水解單元每分鐘,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一個中性蛋白酶單元水解酪蛋白,產生顏色和1.0 μmole 酪氨酸每5小時,pH7.5,37℃下產生的相同。一個梭菌蛋白酶單元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分鐘水解1.0 μmole BAEE。
制備說明
該產品相當于最初的40%硫酸銨部分 Mandl, I., et al.,J. Clin.Invest., 32, 1323 (1953).溶液通常是在TESCA緩沖液(含有50mM TES、0.36mM氯化鈣,37℃時pH 7.4)中按1-2 mg/mL進行制備。
Sigma-Aldrich是生命科學與高科技公司,其生物化學與有機化學產品、試劑盒和服務被廣泛應用于染色體組和蛋白質組研究等生命科學研究、生物技術、藥品開發(fā)和疾病診斷以及藥品、診斷和高科技產品的制造。
膠原酶 來源于溶組織梭菌