簡要描述:銅藍蛋白(Cp)含量測試盒 銅藍蛋白(Ceruloplasmin,Cp)測定試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實驗室產(chǎn)品.為客戶全面解決實驗、生產(chǎn)、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務。
詳細介紹
品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥 |
銅藍蛋白(Cp)含量測試盒
微量法100T/48S
注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
銅藍蛋白是血漿的含銅蛋白,有運輸銅的功能,同時具有氧化酶的活性,是細胞外液重要的抗氧化劑。
測定原理:
銅藍蛋白催化3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺生成藍色產(chǎn)物,在645nm處有特征吸收峰,依此可得銅藍蛋白活性。
自備實驗用品及儀器:
天平、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體7mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體15mL×1瓶,4℃避光保存。(使用前37℃預熱)
樣本前處理:
血清(漿)等液體樣本:直接檢測。
動植物組織樣本:稱取約0.1g組織,加入1mL蒸餾水,進行冰浴勻漿。10000g ,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
測定操作表:
分光光度計/酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至645nm,蒸餾水調零。
操作表
空白管 | 測定管 | |
樣品(µL) | 30 | 30 |
試劑一(µL) | 90 | 90 |
試劑二(µL) | 60 | |
混勻,37℃預熱5min | ||
試劑三(µL) | 120 | 120 |
混勻,37℃反應30min | ||
試劑二(µL) | 60 | |
混勻,25℃室溫放置5min,取200µL于微量石英比色皿/96孔板中,測定645nm處吸光值。 ΔA=A測定-A空白。 |
計算公式:
用微量石英比色皿測定的計算公式如下
按體積計算
酶活定義:37℃條件下, 每分鐘每毫升樣品與底物作用吸光度升高0.01為一個酶活單位。
Cp活力(U/mL)=ΔA×V反總÷0.01÷V樣÷T = 33.33×ΔA
按鮮重計算
單位定義:37℃條件下,每分鐘每克樣品與底物作用吸光值升高0.01為一個酶活單位。
Cp活力(U/g鮮重)=ΔA×V反總÷0.01÷(W×V樣÷V樣總)÷T = 33.33×ΔA÷W
按蛋白濃度計算
單位定義:37℃條件下,每分鐘每毫克蛋白樣品與底物作用吸光值升高0.01為一個酶活單位。
Cp活力(U/ mg prot)=ΔA×V反總÷0.01÷(Cpr×V樣)÷T = 33.33×ΔA÷Cpr
V樣:0.03 mL;V反總:0.3 mL;T:反應時間,30min;V樣總:加入提取液體積,1mL; Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g
用微量石英比色皿測定的計算公式如下
按體積計算
酶活定義:37℃條件下, 每分鐘每毫升樣品與底物作用吸光度升高0.005為一個酶活單位。
Cp活力(U/mL)=ΔA×V反總÷0.005÷V樣÷T = 66.66×ΔA
按鮮重計算
單位定義:37℃條件下,每分鐘每克樣品與底物作用吸光值升高0.005為一個酶活單位。
Cp活力(U/g鮮重)=ΔA×V反總÷0.005÷(W×V樣÷V樣總)÷T = 66.66×ΔA÷W
按蛋白濃度計算
單位定義:37℃條件下,每分鐘每毫克蛋白樣品與底物作用吸光值升高0.005為一個酶活單位。
Cp活力(U/ mg prot)=ΔA×V反總÷0.005÷(Cpr×V樣)÷T = 66.66×ΔA÷Cpr
V樣:0.03 mL;V反總:0.3 mL;T:反應時間,30min;V樣總:加入提取液體積,1mL; Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g
注意事項:
試劑二和試劑三有一定的毒性和刺激性,請操作時做好防護措施。
上海牧榮生物科技有限公司
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