原地的雜交

納米金探針的小尺寸及其隨后接近核抗原的能力，與銀增強獲得的高靈敏度相結合，使它們成為用于特異DNA序列的超靈敏原位雜交檢測的優(yōu)異試劑，無論有無原位PCR。使用生物素化的酪胺(催化報道沉積或CARD，也稱為酪胺信號擴增或TSA)擴增靶信號獲得了驚人的結果:用納米金-鏈霉抗生物素蛋白和銀增強檢測產物，即使在只有一個或兩個靶基因拷貝的細胞中也產生清晰的信號

用CARD擴增納米金-銀染技術檢測SiHa細胞中人乳頭瘤病毒16的單拷貝。這種來源于宮頸癌的細胞系僅含有一到幾個拷貝的人乳頭瘤病毒16，其表現(xiàn)為單個斑點。細胞離心制劑，核固紅復染（光學顯微照片由薩爾茨堡州蘭肯斯坦市G. Hacker博士提供。奧地利）。

優(yōu)勢

• 比NBT-BCIP堿性磷酸酶或過氧化物酶結合標記擴增用于單基因拷貝解析更靈敏。
• 大多數(shù)情況下不需要更長的PCR程序:避免了由于錯誤引發(fā)和擴增子擴散導致的假陽性。
• 用標準明視野顯微鏡很容易看到黑色。不需要昂貴的熒光光學器件，也沒有自發(fā)熒光或漂白的問題。
• 黑色信號顏色與全強度標準細胞和核染色（H & E、核堅牢紅、甲基綠）兼容。
• 也可用于電磁研究的高空間分辨率信號。

電子顯微鏡

納米金為電子顯微鏡樹立了很好的性能標準。

納米金綴合物很容易擴散幾十微米到組織、滲透細胞和細胞核中，而大多數(shù)膠體金探針很難做到這一點。染色更符合化學計量，背景更低。盡管1.4納米金顆粒在50-120 kX放大倍數(shù)下甚至在80納米的切片中（在其他未染色的樣品中）都是直接可見的，但在用銀顯影劑（LI銀或HQ銀）短暫增強（1-5分鐘）后它們更容易顯現(xiàn)。即使使用醋酸鈾、鋨或檸檬酸鉛染色，也可以在較低的放大倍數(shù)下輕松看到2至100納米的銀顆粒（大小取決于顯影時間）。

這張掃描透射電子顯微鏡（STEM）圖像清楚地顯示，單馬來酰亞胺-納米金標記（箭頭）具體發(fā)生在IgG分子的鉸鏈硫醇位點。

光學和共聚焦顯微鏡

用抗微管蛋白初級抗體標記的紡錘體微管，隨后是（左）山羊抗小鼠膠體金或（右）山羊Fab抗小鼠納米金（光學顯微照片由俄亥俄州立大學D. Vandré和R. Burry博士提供。原始放大倍數(shù)= 1300倍）。

納米金探針對透化細胞和細胞核具有出色的穿透性，類似于免疫熒光探針，遠優(yōu)于膠體金探針?！凹{米金-Fab"探針比免疫熒光IgG標記小。納米金探針絕對不會聚集，而且非常穩(wěn)定，因為納米金與結合生物分子共價連接。通過隨后的短暫（5-15分鐘）銀增強（LI銀），它們給出了即使在普通明場光學顯微鏡（不需要紫外光學器件）中也可見的信號，其靈敏度通常優(yōu)于熒光。由于同樣的納米金探針也可以用于電鏡，因此可以在光學顯微鏡或共聚焦顯微鏡下進行初步染色，同時可以在超微結構水平上檢查平行樣品。這種靈活性是熒光探針所不具備的。納米金現(xiàn)在可以與鏈霉親和素和抗生物素Fab’結合用于核酸檢測。

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印跡和免疫化學技術

納米金-抗體結合物已用于檢測《0.1皮克（7×10-19摩爾）的抗原。這種靈敏度優(yōu)于大多數(shù)放射性、酶、膠體金或熒光技術。事實上，納米金標記是已知*靈敏的檢測方法之一。它與化學發(fā)光法不相上下，但提供了長期記錄，沒有膠片、顯影和暗室程序的麻煩，而且時間短得多。納米金試劑也可用于Westerns，我們的納米金-鏈霉親和素或納米金-抗生物素結合物可提供超靈敏的核酸檢測。

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納米金標記條帶的凝膠染色

蛋白質或其他分子用納米金標記后，可以在聚丙烯酰胺凝膠上運行。隨后，可能會開發(fā)出LI Silver或者GoldEnhance™對含金帶進行特殊染色。該過程快速、靈敏且具有選擇性，只需幾分鐘即可完成密集染色。它也適用于轉印污點。這可用于區(qū)分哪些成分用納米金標記