伯樂(lè)電穿孔儀是一種實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,用于通過(guò)電穿孔技術(shù)將外部物質(zhì)(如DNA、RNA、蛋白質(zhì)、藥物等)引入細(xì)胞內(nèi)部。電穿孔利用短暫的高電壓電脈沖暫時(shí)擾亂細(xì)胞膜的磷脂雙分子層,從而創(chuàng)建小孔讓外部物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞。
優(yōu)勢(shì):
1. 高效性:伯樂(lè)電穿孔儀可以高效率地將各種分子輸送到細(xì)胞內(nèi),這對(duì)于基因編輯、轉(zhuǎn)染、藥物輸送等實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要。
2. 廣泛適用性:該儀器適用于多種類(lèi)型的細(xì)胞,包括難以轉(zhuǎn)染的原發(fā)性細(xì)胞和干細(xì)胞。
3. 細(xì)胞活性高:由于電穿孔是物理方法,與化學(xué)方法相比,它通常對(duì)細(xì)胞的活性和功能影響較小,維持了較高的存活率。
4. 靈活性:用戶(hù)可以根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)需求調(diào)節(jié)電脈沖的參數(shù),如電壓、脈沖寬度和脈沖次數(shù),以?xún)?yōu)化轉(zhuǎn)染效果。
5. 精確控制:現(xiàn)代電穿孔儀器通常配備有計(jì)算機(jī)控制界面,可以實(shí)現(xiàn)精確且重復(fù)性好的操作。
6. 安全性:設(shè)計(jì)中考慮了操作人員的安全,確保在產(chǎn)生電脈沖的同時(shí)防止電流對(duì)人體的傷害。
7. 易用性:儀器通常具有用戶(hù)友好的界面和協(xié)議指導(dǎo),使得實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單易懂。
應(yīng)用領(lǐng)域:
1. 分子生物學(xué):在基因表達(dá)和沉默實(shí)驗(yàn)中,用電穿孔將siRNA、shRNA、miRNA或質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞。
2. 藥物開(kāi)發(fā):研究新藥對(duì)細(xì)胞的影響時(shí),通過(guò)電穿孔將藥物分子直接送入細(xì)胞內(nèi),進(jìn)行藥物篩選和毒性測(cè)試。
3. 癌癥研究:向免疫細(xì)胞中引入腫瘤相關(guān)抗原,用于激活免疫系統(tǒng)對(duì)抗癌細(xì)胞。
4. 細(xì)胞治療:在細(xì)胞治療領(lǐng)域,電穿孔可用于制備工程化的T細(xì)胞,用于CAR-T細(xì)胞療法的開(kāi)發(fā)。
5. 組織工程:在組織工程中,用電穿孔技術(shù)向細(xì)胞內(nèi)輸送生長(zhǎng)因子或分化誘導(dǎo)因子,促進(jìn)細(xì)胞分化和組織再生。
6. 發(fā)育生物學(xué):研究胚胎發(fā)育過(guò)程中基因的表達(dá)模式,通過(guò)電穿孔將mRNA或Morpholino等注入受精卵中。
7. 神經(jīng)科學(xué):研究神經(jīng)元的功能和信號(hào)傳導(dǎo),將染料、蛋白質(zhì)或其他生物大分子引入神經(jīng)元。
8. 免疫學(xué):研究免疫反應(yīng)機(jī)制,通過(guò)電穿孔將特定抗體或抗原引入免疫細(xì)胞來(lái)模擬免疫反應(yīng)。