β-內(nèi)酰胺是一類(lèi)抗生素,包括青霉素和氨芐青霉素。它們含有β-內(nèi)酰胺環(huán)和可變側(cè)鏈。細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)膜相關(guān)酶和青霉素結(jié)合蛋白與 β-內(nèi)酰胺共價(jià)結(jié)合。隨后,抗生素抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成的最后一步,導(dǎo)致自溶。
除了用作抗生素藥物外,β-內(nèi)酰胺還被用作 DNA 克隆的選擇工具。當(dāng)創(chuàng)建新的質(zhì)粒時(shí),會(huì)添加 β-內(nèi)酰胺抗性盒。將質(zhì)粒插入細(xì)菌宿主后,向培養(yǎng)基中添加相應(yīng)的β-內(nèi)酰胺將有效殺死不含目的質(zhì)粒的細(xì)菌菌落。
盡管β-內(nèi)酰胺有很多好處,但它們會(huì)給患者帶來(lái)危及生命的過(guò)敏反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)。不幸的是,很難確定引起過(guò)敏反應(yīng)所需的最小量的β-內(nèi)酰胺,并且用目前可用的標(biāo)準(zhǔn)分析方法很難檢測(cè)微量的β-內(nèi)酰胺。因此,避免使用β-內(nèi)酰胺以防止最終藥品受到污染至關(guān)重要。
細(xì)胞和基因療法開(kāi)發(fā)商和制造商需要認(rèn)識(shí)到β-內(nèi)酰胺風(fēng)險(xiǎn),并需要制定強(qiáng)有力的策略來(lái)防止最終藥品受到污染。藥品制造商在歐盟銷(xiāo)售時(shí)必須遵守 EMA GMP 法規(guī),在美國(guó)銷(xiāo)售時(shí)必須遵守 21 CFR 210/211 - 不符合 cGMP 生產(chǎn)的藥品將被視為摻假。在其 2022 年更新指南2中,F(xiàn)DA 建議采取嚴(yán)格控制措施來(lái)防止污染,包括將加工 β-內(nèi)酰胺和非 β-內(nèi)酰胺藥物的設(shè)施分開(kāi),以及進(jìn)行程序控制以防止受 β-內(nèi)酰胺污染的原材料進(jìn)入非β-內(nèi)酰胺加工設(shè)施。
除非得到緩解,否則在使用某些抗生素(例如作為重組蛋白生產(chǎn)中的選擇標(biāo)記)的設(shè)施中生產(chǎn)的原材料可能會(huì)污染細(xì)胞或基因治療藥物產(chǎn)品。盡管在重組蛋白的下游純化步驟中努力去除抗生素,但殘留量可能仍然存在。如果在細(xì)胞療法制造過(guò)程中將重組蛋白用于培養(yǎng)方案,則最終產(chǎn)品中殘留的β-內(nèi)酰胺可能會(huì)導(dǎo)致過(guò)敏反應(yīng)。
為了您的研究藥物開(kāi)發(fā)和制造的最大利益,FUJIFILM Irvine Scientific 放棄在 Shenandoah 重組蛋白中使用 β-內(nèi)酰胺,現(xiàn)在使用卡那霉素或其他非 β-內(nèi)酰胺抗生素作為選擇標(biāo)記。青霉素和鏈霉素(通常稱(chēng)為“pen-strep")的使用也已被淘汰,取而代之的是慶大霉素。此外,F(xiàn)UJIFILM Irvine Scientific 僅對(duì)用于 cGMP 制造的原材料進(jìn)行資格認(rèn)證,這些原材料不是在加工或含有 β-內(nèi)酰胺的設(shè)施中生產(chǎn)的。
當(dāng)您考慮培養(yǎng)過(guò)程中重組蛋白的來(lái)源時(shí),請(qǐng)確保不存在存在 β-內(nèi)酰胺抗生素的風(fēng)險(xiǎn)。詢(xún)問(wèn)您的重組蛋白供應(yīng)商,它們是否是在使用或加工含有 β-內(nèi)酰胺材料的設(shè)施中生產(chǎn)的,這樣您就更有信心做出了正確的選擇。
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