谷胱甘肽(GSH,g-谷氨酰半胱氨酰甘氨酸)是需氧生物體中主要的非蛋白質(zhì)巰基,在大多數(shù)細(xì)胞中合成。普遍存在的三肽是由谷氨酸和半胱氨酸在 g-谷氨酰半胱氨酰合成酶的催化下結(jié)合形成的。然后通過(guò)谷胱甘肽合成酶添加甘氨酸以形成 GSH。 除了在氫過(guò)氧化物還原為相應(yīng)的醇(或過(guò)氧化氫的情況下為水)的過(guò)程中提供電子外,GSH 還在谷胱甘肽 S-轉(zhuǎn)移酶催化的異生物質(zhì)代謝中充當(dāng)共底物。它也是幾種參與細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸?shù)拇x酶的輔助因子,具有抗氧化劑和輻射防護(hù)劑的作用,并促進(jìn)蛋白質(zhì)折疊和降解。
測(cè)試原理
NWLSS™ 谷胱甘肽測(cè)定是 Tietze 描述的方法的改進(jìn)。通用硫醇試劑5-5'-二硫代雙[2-硝基苯甲酸](DTNB,埃爾曼試劑)與GSH反應(yīng)形成412 nm發(fā)色團(tuán)5-硫代硝基苯甲酸(TNB)和GS-TNB。隨后 GS-TNB 被谷胱甘肽還原酶和 β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 (NADPH) 還原,釋放出第二個(gè) TMB 分子并回收 GSH;從而放大響應(yīng)。最初存在于反應(yīng)混合物中或由 GSH 與 GS-TNB 的混合二硫化物反應(yīng)形成的任何 GSSG 會(huì)迅速還原為 GSH,并在測(cè)定中可檢測(cè)到。
一種基于速率的動(dòng)力學(xué)測(cè)定法,用于定量各種樣品(包括血液、血漿、組織和培養(yǎng)細(xì)胞)中的還原型谷胱甘肽 (GSH) 和氧化型總谷胱甘肽 (GSH)。該試劑盒還適用于清除還原型谷胱甘肽后測(cè)量氧化型谷胱甘肽 (GSSG)。
NWLSS™ 谷胱甘肽 (GSH GSSG) 檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn):
出色的靈敏度低至 5 pMol
當(dāng)樣品用合適的硫醇清除劑(例如 4乙烯基吡啶 (4VP) 或 NEM)預(yù)處理時(shí),可以檢測(cè)谷胱甘肽二硫化物 (GSSG)
目錄編號(hào): | NWK-GSH01 |
格式: | 192 項(xiàng)測(cè)試以 2 X 96 孔微量滴定板檢測(cè)形式呈現(xiàn)。還提供用于分光光度計(jì)的比色皿格式。 |
樣品要求: | 全血、血漿、組織和細(xì)胞裂解物。 |
特異性: | 總谷胱甘肽(GSH 加 GSSG) |
靈敏度: | 使用標(biāo)準(zhǔn)方法為 0.1 µM(適用于全血和某些組織類型)。使用改良的高靈敏度方法為 0.005 µM(適用于血漿中 GSH 水平較低的樣品,或用于清除還原的 GSH 后檢測(cè) GSSG)。聯(lián)系 NWLSS 了解詳情。 |
有可能的使用: | 總 GSH 的定量測(cè)量(還原型加氧化形式) |
儲(chǔ)存和穩(wěn)定性: | 如果儲(chǔ)存在 2-8C 下,自生產(chǎn)之日起 12 個(gè)月 |
套件內(nèi)容: | DTNB 試劑 NADPH NADPH 稀釋劑 GR 酶 GSH (GSSG) 校準(zhǔn)劑 測(cè)定 緩沖液 |
僅供研究使用