借助我們的肽受體 easYmers®,您可以構(gòu)建與您的項(xiàng)目相關(guān)的 MHC I 類(lèi)存儲(chǔ)庫(kù),并開(kāi)始在您自己的實(shí)驗(yàn)室中生產(chǎn) pMHC 復(fù)合物。有超過(guò) 50 種 HLA 同種異型可供選擇。
所有 MHC I 類(lèi) easYmer® 分子均經(jīng)過(guò)生物素化,允許您使用您喜歡的標(biāo)簽制備四聚體。冷凍保存,MHC I 類(lèi) easYmers® 穩(wěn)定且肽可接受 24 個(gè)月;一旦與肽復(fù)合,所得單體可在冰箱中穩(wěn)定保存多年。 我們建議您使用預(yù)測(cè)因子(例如NetMHC 系列或NetMHCpan)作為設(shè)計(jì)單體的輔助工具。如果目標(biāo)特定肽-MHC I 類(lèi)組合預(yù)計(jì)不會(huì)以足夠低的 %Rank 結(jié)合,則該肽不支持穩(wěn)定復(fù)合物形成的風(fēng)險(xiǎn)很高。因此,為了確保正確的肽加載和 CD8+ T 細(xì)胞的最佳染色,我們強(qiáng)烈建議您通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證肽-MHC (pMHC) 復(fù)合物的成功形成。為此,easYmer 試劑盒包含一個(gè)基于 FACS 的簡(jiǎn)單方案,允許您驗(yàn)證正確的肽加載(單擊此處了解方案)。 裝載肽的 MHC 單體可以長(zhǎng)期冷凍保存以供以后四聚化。當(dāng)需要時(shí),這些單體可以很容易地與標(biāo)記的鏈霉親和素(例如用于經(jīng)典流式細(xì)胞術(shù)分析的熒光團(tuán)標(biāo)記或用于CyTOF分析的金屬標(biāo)記)四聚化。為了獲得最佳的 CD8+ T 細(xì)胞 HLA 四聚體染色效果,請(qǐng)遵循我們的MHC I 類(lèi)四聚體染色方案。 easYmers® 技術(shù)具有高度靈活性,適用于: 肽-MHC I 類(lèi)相互作用的評(píng)估。 表位/新表位篩選——小規(guī)模四聚體生產(chǎn),用于并行篩選大量不同的表位。 供體篩選——大規(guī)模四聚體生產(chǎn),用于篩選大量(供體)樣本中的單個(gè)表位。 50+ HLA-A | HLA-B |提供 HLA-C 同種異型 鼠標(biāo) H2-Db、H2-Kb 可用
將肽添加至 easYmer® 并孵育。添加鏈霉親和素綴合物并對(duì) T 細(xì)胞進(jìn)行染色。
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