方法:酶聯(lián)免疫吸附測定
Volition 的 Nu.Q ® Discover H3.1 ELISA 研究專用試劑盒可檢測血漿中含有組蛋白 H3 的循環(huán)完整核小體的定量水平。核小體是構(gòu)成人類染色質(zhì)的 DNA 和組蛋白的重復(fù)亞基。在細(xì)胞損傷(例如細(xì)胞凋亡或壞死)期間,染色質(zhì)碎裂成寡核小體或單核小體,可以釋放到血流中。
與免疫功能相關(guān)并導(dǎo)致核小體釋放到生物體液中的特定細(xì)胞死亡過程被稱為 NETosis。在此過程中,中性粒細(xì)胞產(chǎn)生中性粒細(xì)胞胞外陷阱(NET),它們是含有核小體和抗菌蛋白的長網(wǎng)狀染色質(zhì)結(jié)構(gòu)鏈。 NET 的功能是捕獲病原體(病毒、細(xì)菌、癌癥等),并且被認(rèn)為在適當(dāng)控制下具有保護(hù)作用,但如果控制不當(dāng)則有害。系統(tǒng)性 NET 水平升高與免疫介導(dǎo)的病理和不良預(yù)后相關(guān)。
鑒于它們與疾病的關(guān)系,測量人類樣本中的 NET 和 NETosis 的過程非常重要。目前,有幾種常見的方法可以直接測量 NET,包括 NET 顯微鏡和 NET 流式細(xì)胞術(shù)。這兩種方法都需要在過程和費力的樣品處理中捕獲 NET 的形成。 NETosis ELISA 方法可測量 NET 成分,包括雙鏈 DNA、組蛋白、核小體、瓜氨酸組蛋白、與 DNA 復(fù)合的顆粒蛋白以及單獨的顆粒蛋白。這些可以通過各種 NETosis ELISA 試劑盒(MPO ELISA、MPO+DNA 復(fù)合物 ELISA、citH3 ELISA、總核小體 ELISA)進(jìn)行測量。其中一些 NETosis ELISA 試劑盒可在市場上購買,但大多數(shù)是內(nèi)部開發(fā)的檢測方法。 Volition 的 Nu.Q® Discover H3。1 ELISA 研究專用試劑盒提供了一套由重組核小體、對照和 ng/mL 標(biāo)準(zhǔn)化輸出組成的標(biāo)準(zhǔn)品,并且能夠通過 ELISA 用作 NET 或 NETosis 的替代測量。
Nu.Q ® Discover H3.1 ELISA 研究專用試劑盒是一種強大的研究工具,適用于研究核小體和中性粒細(xì)胞胞外陷阱 (NET) 的廣泛研究領(lǐng)域,例如:
腫瘤學(xué)
混凝
敗血癥
自身免疫性疾病
神經(jīng)退行性疾病
炎
NETopathies(中性粒細(xì)胞胞外陷阱相關(guān)疾?。?/span>
測定原理:
Nu.Q ® Discover H3.1 ELISA 研究專用試劑盒是一種夾心形式的比色測定,僅供研究使用 (RUO)。將樣品與測定緩沖液一起添加到涂有抗 H3.1 抗體的孔中。經(jīng)過第一次孵育和洗滌步驟后,添加與 HRP 偶聯(lián)的檢測抗體。經(jīng)過第二次孵育和洗滌步驟后,添加 TMB 底物。添加終止溶液后讀取吸光度。獲得的信號與樣品中存在的 H3.1 核小體濃度成正比。該比色測定以 96 孔板形式提供,可實現(xiàn)高通量和低通量分析。
僅供研究使用。不用于診斷過程。