細(xì)胞健康分析試劑、試劑盒和工具可用于測量細(xì)胞培養(yǎng)活力的一般和特異性指標(biāo)。其中,活力檢測可用作測量細(xì)胞健康的一般指標(biāo),或與細(xì)胞毒性檢測一起用于評估處理條件的影響。增殖檢測通常使用DNA合成和細(xì)胞分裂作為特定條件或處理下細(xì)胞代謝活性的測量指標(biāo)。細(xì)胞毒性試劑盒可采用生物還原讀數(shù)來評估代謝活性。
培養(yǎng)物污染是進(jìn)行有效、可靠細(xì)胞培養(yǎng)的常見障礙之一。盡管某些污染物可通過對培養(yǎng)物進(jìn)行仔細(xì)的顯微鏡檢查而檢測到,但諸如支原體等污染物無法通過視覺方法檢測。因此,應(yīng)使用能夠可靠檢測微生物污染物的試劑盒和試劑對培養(yǎng)物進(jìn)行定期篩查。培養(yǎng)室需要使用能夠在污染出現(xiàn)時將其降低或消除的試劑,從而增強無菌技術(shù)并形成良好的培養(yǎng)室規(guī)范。
可測量細(xì)胞增殖和細(xì)胞活力的檢測常被用于監(jiān)測用各種刺激物處理后培養(yǎng)物中細(xì)胞的應(yīng)答和健康狀況。檢測方法的選擇取決于所要評估的細(xì)胞數(shù)、類型以及預(yù)期的結(jié)果。細(xì)胞增殖檢測可以監(jiān)測一段時間內(nèi)的細(xì)胞數(shù)、細(xì)胞分裂的次數(shù)、代謝活性或DNA合成。使用諸如臺盼藍(lán)或鈣黃綠素-AM等活性染料進(jìn)行的細(xì)胞計數(shù)分析可以提供增殖率以及存活細(xì)胞的百分比。5(6)-羧基熒光素二乙酸酯N-琥珀酰亞胺酯(CFSE)是測量細(xì)胞群所經(jīng)歷的細(xì)胞分裂次數(shù)的常用方法。進(jìn)入細(xì)胞后,CFSE會被細(xì)胞內(nèi)酯酶裂解形成熒光化合物,而琥珀酰亞胺基酯基會與細(xì)胞內(nèi)蛋白上的伯胺發(fā)生共價反應(yīng)。每次分裂后,每個子細(xì)胞的熒光強度都會減半,使得可以通過流式細(xì)胞儀而對細(xì)胞分裂的代數(shù)進(jìn)行簡單的檢測。
我們用于測定細(xì)胞活力和增殖的全面工具和解決方案利用了多種方法,并包括:
DNA合成增殖檢測
代謝增殖檢測
發(fā)光細(xì)胞活力檢測
熒光染料增殖檢測
用于3D培養(yǎng)的活細(xì)胞/死細(xì)胞/總細(xì)胞三重染色
臺盼藍(lán)染料排除法活力計數(shù)
可測量代謝活性的檢測可適用于增殖、活力和細(xì)胞毒性的分析。四唑鹽(如MTT和XTT)至有色甲?化合物的還原反應(yīng),或刃天青的生物還原反應(yīng),僅發(fā)生在代謝活性細(xì)胞中?;钴S增殖的細(xì)胞會提高其代謝活性,而諸如暴露于毒素的受損細(xì)胞則會表現(xiàn)出活性的下降。
細(xì)胞死亡對于發(fā)育和體內(nèi)穩(wěn)態(tài)過程中的多種正常生理性功能是必需的。腫瘤細(xì)胞能夠逃避也被稱為凋亡的程序性細(xì)胞死亡,這種能力是大多數(shù)類型癌癥的標(biāo)志。多種細(xì)胞蛋白,包括細(xì)胞表面受體、接頭蛋白、蛋白酶和線粒體成分,可通過細(xì)胞凋亡而在細(xì)胞存活與死亡之間調(diào)節(jié)出一種良好的平衡。通過精心選擇檢測不僅能夠幫助分析細(xì)胞培養(yǎng)條件和處理條件對細(xì)胞健康的影響,還能用于分析它們對細(xì)胞健康影響的機制。我們可提供用于早期、中期和晚期凋亡檢測的全面檢測產(chǎn)品線。
維持無污染的細(xì)胞培養(yǎng)物是細(xì)胞研究的基礎(chǔ)條件。支原體污染是普遍的細(xì)胞培養(yǎng)問題之一,而支原體是一種形態(tài)特征為亞微米大小且不存在細(xì)胞壁的細(xì)菌,因此難以或無法通過顯微鏡檢出且對多種抗生素具有抗性。盡管支原體通常不會引起細(xì)胞死亡,但它們可對培養(yǎng)的細(xì)胞造成多種影響,包括代謝異常、增殖減慢和染色體畸變。簡而言之,支原體污染降低了相關(guān)細(xì)胞系的有效性,無法為生命科學(xué)研究提供有意義的數(shù)據(jù)。
我們用于支原體檢測和消除的工具包括:支原體檢測和消除
LookOut®支原體PCR檢測試劑盒,及其他用于可靠、靈敏檢測細(xì)胞培養(yǎng)物中支原體的PCR和qPCR試劑盒
用于通過支原體培養(yǎng)進(jìn)行檢測的胰蛋白示磷酸鹽肉湯和其他試劑
用于通過熒光DNA染色法進(jìn)行支原體檢測的DNA染料
用于支原體污染消除的LookOut®支原體消除噴霧和試劑