選擇適當(dāng)?shù)募?xì)胞培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)中非常重要的步驟,它會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)速率、狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
1.首先參考文獻(xiàn)和廠家建議:
查閱ATCC(American Type Culture Collection)或相關(guān)文獻(xiàn),了解以前研究同一或相似細(xì)胞系的人所使用的培養(yǎng)基和條件。細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)物廠商提供的說(shuō)明都是有用的參考資料。
2.根據(jù)細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)需求:
常規(guī)來(lái)說(shuō),培養(yǎng)基均需要添加10-15%血清(一般為胎牛血清)以提供蛋白,部分生長(zhǎng)因子,維生素及其他輔助物質(zhì)。以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)、維持表型。非無(wú)菌室的細(xì)胞房應(yīng)常規(guī)添加抗生素。
某些細(xì)胞可能需要特殊培養(yǎng)條件,以滿足其特殊的要求。如原代B細(xì)胞需要添加LPS以激活,神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)常需添加B-27等。
也可基于實(shí)驗(yàn)改變培養(yǎng)條件,如轉(zhuǎn)染細(xì)胞或細(xì)胞同步化時(shí)常使用減血清培養(yǎng)基opti-MEM。
3.進(jìn)行試驗(yàn)性培養(yǎng):
采用此類培養(yǎng)或更換培養(yǎng)條件時(shí)(如換血清),建議進(jìn)行試驗(yàn)性培養(yǎng),以確定所選培養(yǎng)組分是否適用于您的細(xì)胞。
讓我們幫助您選擇胎牛血清
0501金牌胎牛——推薦用于原代胚胎干細(xì)胞、iPSC、T細(xì)胞、B細(xì)胞等
0502特級(jí)胎牛——推薦用于原代成纖維、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞等
0503優(yōu)級(jí)胎牛——推薦用于常見細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞,工具細(xì)胞等
盡管胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中有許多重要作用,但也需注意一些潛在的問(wèn)題。例如,由于血清的來(lái)源和制備過(guò)程,可能存在批次間差異,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果難以重復(fù)/產(chǎn)物不穩(wěn)定。澳范擁有穩(wěn)定的血源和產(chǎn)能,盡量避免了批次效應(yīng)的產(chǎn)生。
細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)階--原代細(xì)胞系培養(yǎng)是細(xì)胞培養(yǎng)中最常規(guī)的環(huán)節(jié),而細(xì)胞從來(lái)源又可分為細(xì)胞系和原代細(xì)胞。從培養(yǎng)系統(tǒng)又可分為常規(guī)培養(yǎng)及3D/基質(zhì)培養(yǎng)系統(tǒng)。不同組織來(lái)源細(xì)胞所需培養(yǎng)體系差別較大。
目前可提供的原代培養(yǎng)技術(shù)支持(維持培養(yǎng)與接種部分有不同):
序號(hào) | 細(xì)胞種類 | 推薦添加劑 |
1 | 角質(zhì)形成細(xì)胞 | BPE、人表皮生長(zhǎng)因子、皮質(zhì)醇、IGF-1、轉(zhuǎn)鐵蛋白等 |
2 | 黑色素細(xì)胞 | 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、BPE、肝素、皮質(zhì)醇、IGF-1、轉(zhuǎn)鐵蛋白、佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯等 |
3 | 成纖維細(xì)胞 | 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、肝素、皮質(zhì)醇和表皮生長(zhǎng)因子等 |
4 | 大血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、肝素、皮質(zhì)醇、表皮生長(zhǎng)因子和抗壞血酸等 |
5 | 平滑肌細(xì)胞 | 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、肝素、IGF-1和BSA等 |
6 | 骨骼肌成肌細(xì)胞 | 胰島素、EGF、FGF等 |
7 | 乳腺上皮細(xì)胞 | EGF、皮質(zhì)醇、異丙腎上腺素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素,BPE等 |
8 | 肝細(xì)胞 | 地塞米松、胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、硒復(fù)合物、BSA和亞油酸等 |
9 | 神經(jīng)細(xì)胞/干細(xì)胞 | 需要依據(jù)細(xì)胞亞型 |